試劑盒的标準操作步驟分析

本公司經營上萬種Elisa試劑盒，平時老師咨詢的産(chǎn)品說明書也大不相同，但是大家所不知道的是，其實Elisa試劑盒的操作步驟都是一樣的，做好操作步驟是一個産(chǎn)品試驗的關鍵存在，出一點差錯(cuò)都是不行的，上海恒遠生物問您分享zui全面的試劑盒操作步驟。歡迎賞析！

一般正常的實驗操作步驟如下：
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解)；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋後的樣品符合試劑盒的檢測範圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1.        加樣：分别設空白孔、标準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，餘孔分别加标準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣将樣品加於酶标闆孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶标闆加上蓋或覆膜，37℃反應120分鍾。爲保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的标準品溶液。
2.        棄去液體，甩幹，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時内配制)，酶标闆加上覆膜, 37℃反應60分鍾。
3.        溫育60分鍾後，棄去孔内液體，甩幹，洗闆3次，每次浸泡1-2分鍾，大約400μl/每孔，甩幹(也可輕拍将孔内液體拍幹)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl，酶标闆加上覆膜37℃反應60分鍾。
5.        溫育60分鍾後，棄去孔内液體，甩幹，洗闆5次，每次浸泡1-2分鍾，350μl/每孔，甩幹(也可輕拍将孔内液體拍幹)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标闆加上覆膜37℃避光顯色(30分鍾内，此時肉眼可見标準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，後3-4孔梯度不明顯，即可終止)。
7.        依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色
。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。爲瞭保證實驗結果的準確性，底物反應時間到後應盡快加入終止液
。
8.        用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液後立即進行檢測。