中國科學院高能物理研究所胡老師十月底在我司訂(dìng)購瞭(le)人Human(NGAL)elisa kit。昨日老師反應實驗已經做完,但是反應試劑盒除瞭(le)滴加自帶的标準物孔顯色外,其他的加樣孔都沒有顯色。胡老師並(bìng)說明瞭(le)實驗樣本都是血清樣,其中部分樣本稀釋瞭(le)一百倍,有幾個血清樣加瞭(le)高濃度的NGAL。但實驗結果不顯色特我司技術出現這問題的可能原因?
經技術溝通交流後胡老師同意将剩餘試劑盒試劑及樣本交由我司安排技術進行複測(cè)分析原因所在。現我司已收到老師的剩餘樣跟試劑,且已安排技術人員進行複測(cè),並(bìng)根據複測(cè)結果答複胡老師出現該情況的具體原因。
與此同時我司技術提出瞭如下的可能原因:
1.試劑(jì)已過(guò)效期,或不同試劑(jì)盒組分混用
2.錯(cuò)加、漏加試劑(jì)底物、顯色劑(jì) A或B。
3.洗闆及加樣過(guò)程中,酶标受污染失活失去催化顯色劑(jì)顯色的能力。
4.終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)底物緩沖(chōng)液配制。
5.蒸餾水有問題。
正確的解決對策
1.實驗前檢查試劑的組分及批号,確(què)認未過期以及所有組分均屬對(duì)應的試劑盒。不同試劑盒或不同批号的試劑不能混用。
2.嚴格按說明書的步驟操作,加完試劑後(hòu)可觀(guān)察一下液面高度是否一緻,以減少漏加現象
3.確(què)認盛酶标的容器不含酶抑制劑如疊(dié)氮鈉等,確(què)認配制洗液的容器已洗幹淨。
4.每次配制時(shí)都應看清标簽(qiān)标明物質。
5.確(què)認配制洗液的純(chún)化水達到要求且未污染,與好蒸餾水比較。