去甲腎(shèn)上腺素ELISA試劑(jì)盒使用說明書

去甲腎(shèn)上腺素ELISA試劑(jì)盒使用說明書

(上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司)

1、應用範圍

此試劑盒可用於(yú)人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測(cè)。

2、臨床意義

兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質、交感神經系統和大腦産生。它們幾乎影響所有的組織，並(bìng)與其它激素和神經系統一起參與各種生理過程的調節。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝産物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用於(yú)疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對於(yú)疾病的診斷及神經系統腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用於(yú)嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用於(yú)成神經細胞瘤和神經節細胞瘤的診斷。因爲在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結構相同，因此此試劑盒可用於(yú)測大鼠、小鼠或其它動物。

3、實驗原理

此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被瞭(le)羊抗兔抗體。之後加入的液态抗體可以結合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期内結合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶标二抗一起在微孔内溫育，此酶标二抗可結合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液後，溶液所顯示的顔色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結果可直接從(cóng)标準曲線上讀取。

4、貯存與穩定性

試劑盒和運輸環境和儲存環境溫度爲2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩定性及試劑的準備将在相關章節中闡述。開封的試劑盒在有效期内穩定，前提是将試劑盒用袋子密封並(bìng)儲存於(yú)2-8℃的環境下。

5、樣品的採集與儲存

注意	人體内的兒(ér)茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品採(cǎi)集前72小時内病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMT抑制劑，還有降血壓類藥物。

血漿（EDTA）

注意	血液採(cǎi)集後兩小時内，将血液樣品冷藏於(yú)2-8℃的環境下直緻離心獲取血漿。
注意靜脈穿刺採(cǎi)集全血的常規注意事項。從採(cǎi)集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質。
貯存		2-8℃	≤-20℃	避免熱源或太陽直射，避免反複(fù)凍(dòng)融，冷凍(dòng)狀态下運輸樣品。
穩定性		6h	1個月

尿液

可以是自然尿液也可使用24h尿液。将病人24h内的所有尿液都收集到，並(bìng)混合於(yú)含10-15ml 6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。
貯存	≤-20℃	避免熱源或太陽直射，避免反複(fù)凍(dòng)融，冷凍(dòng)狀态下運輸樣品。
穩定性	6個月

6、試劑盒成分

注意：試劑盒有足夠做96份單(dān)孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分

數量	标志	成分
1×12×8	MTP	包被闆，可拆，微孔中包被瞭(le)抗兔IgG（羊，單(dān)克隆）。
1×6×2.5ml	CAL A-F	标準品A-F，即用 腎(shèn)上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml (0;8;27;82;273;819nmol/L) 去甲腎(shèn)上素:0;5;15;50;150;500ng/mL (0;30;89;296;887;2955nmol/L) 多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL (0;78;228;750;2938;14688nmol/L) 内含[-]腎上腺素， [-]去甲腎上腺素， [-]多巴胺(有生物活性), 0.1M的HCl
1×2×2.5ml	CONTROL 1+2	質控品1+2 即用,含: [-]腎(shèn)上腺素，[-]去甲腎(shèn)上腺素， [-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl, 具體濃度及可允許範(fàn)圍請見試劑(jì)瓶标簽.
1×250μL	ENZCONJ CONC	酶聯(lián)物 濃(nóng)縮型（100×） 内含：堿性磷酸酶标記的抗體，Tris緩(huǎn)沖(chōng)液， HCl，0.01%的NaN3
2×	EXTRPLATE	提取闆（微孔闆） 每闆24孔，包被瞭(le)硼酸親和凝膠(jiāo)。
1×60ml	EXTRBUF	提取緩沖液 粉紅(hóng)色，即用，内含 ：0.016%的NaN3
2×1.25ml	COMT LYO	COMT凍幹粉 内含:兒(ér)茶酚-氧位-甲基轉移酶（豬(zhū)肝），NaN3
1×2ml	COMT ADD	COMT添加劑 内含:人血漿(jiāng)，穩定劑(jì)，0.01%硫柳汞。
1×7ml	ANTISERUM DO	去甲腎上腺素抗血清 紫羅蘭色，即用， 内含:抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩(huǎn)沖(chōng)液，穩定劑。
2×1.25ml	COENZ	酶聯複合物 即用，内含 ：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑(jì)。
1×3ml	ENZBUF	酶緩沖液 即用，内含：Tris緩(huǎn)沖(chōng)液，HCl，穩定劑。
1×17ml	RELEASEBUF	Release緩沖液 黃(huáng)色，即用，内含：0.1M的HCl，指示劑(jì)。
1×3ml	ACYLREAG	酰化試劑 即用，内含：二甲基甲酰胺，乙醇。 注意：有毒，高可燃性。
1×50ml	WASHBUR CONC	洗滌(dí)液 濃(nóng)縮型（10×） 内含：Tris緩(huǎn)沖(chōng)液，HCl，吐溫，0.2%的NaN3
1×9×	PNPP SUBS	PNPP底物片 内含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）
1×27ml	PNPP BUF	PNPP底物緩沖液 即用，内含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN3
1×15ml	PNPP STOP	PNPP終止液 即用，内含：1M的NaOH，0.25M的EDTA
3×	FOIL	粘性金屬闆