培養基的制備方法

培養基的制備步驟
（一）準確稱量試劑 根據不同的菌類和用途，選擇适宜的培養基，培養基所需試劑必須純淨。
（二）校正pH值 将稱量好的培養基各種成分放入容器内，标記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N
NaOH和1N HCl調節pH值到适宜範圍内。
（三）過濾 将玻璃漏鬥置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏鬥中，将上述培養基倒入其中過濾至透明。
培養基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸後即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度随壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，採用高壓蒸汽滅菌比幹熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分後，其蛋白質易於凝固變性，因爲蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。
高壓蒸汽滅菌，一般採用15磅／平方（即1.05kg／cm2）壓力，此時的溫度是121.3℃。滅菌20～30分鍾後，可達到*滅菌的目的。在進行滅菌的時候，首先要把滅菌鍋内的冷空氣排出
，否則，冷空氣存在會降低鍋内的實際溫度，影響滅菌效果。一、培養基的制備原則和要求
培養基是根據各類微生物生長繁殖的需要，用人工方法把多種物質混合而成的營養物。一般用來分離、培養菌類。常用的培養基有基礎培養基、增菌培養基、選擇培養基、鑒别培養基和厭氧培養基。在制備培養基時，應掌握如下原則和要求
：
（一）培養基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養物質。所用的化學藥品必須純淨，稱取的份量務必準確。
（二）培養基的酸堿度應符合細菌生長要求。按各種培養基要求準確測定調節pH值。多數細菌生長的适宜pH值爲7.2～7.6，呈弱堿性。
（三）培養基的滅菌時間和溫度，應按照各種培養基的規定進行，以保證滅菌效果及不損失培養基的必需營養成分。培養基經滅菌後，必須置37℃溫箱中培養24小時，無菌生長者方可應用。
（四）所用器皿須潔淨，忌用鐵或鋼質器皿，要求沒有抑制細菌生長的物質存在。
（五）制成的培養基應該是透明的，以便觀察細菌生長性狀以及其他代謝活動所産生的變化。
（四）分裝 将過濾後的培養基分裝於中試管或三角瓶内（試管内每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包紮好，準備滅菌。
（五）滅菌二、培養基制備過程
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