您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 恒遠生物|小鼠T淋巴細胞 CTLL-2 培養攻略

恒遠生物|小鼠T淋巴細胞 CTLL-2 培養攻略

  • 發布日期:2025-03-12      浏覽次數:978
    •  一、細胞基本信息

      品牌名稱(chēng):  恒遠(yuǎn)生物
      産(chǎn)品貨(huò)号:  HYCC20033
      細胞名稱:CTLL-2
      中文名稱(chēng):小鼠T淋巴細(xì)胞
      種屬來源:小鼠
      組織來源:T細胞
      細胞形态:淋巴母細胞樣
      生長特性:懸浮生長
       
      二 、培養條件
      氣(qì)相:95%空氣(qì),5%二氧化碳
      溫度:37℃
       
      三 、培養基與添加物
      基礎(chǔ)培養(yǎng)基:RPMI-1640
      添加物:10%特級(jí)胎牛血清(FBS)、100U/ml(或100IU/ml)IL-2、1%青黴素/鏈(liàn)黴素(P/S)
      注意,有些培養(yǎng)體(tǐ)系可能略有不同,但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。
       
      四、細胞培養步驟
       
      1. 細胞複蘇
      從(cóng)液氮罐或-80℃冰箱中取出凍(dòng)存管 ,迅速放入37℃水浴中搖晃解凍(dòng)。
      将解凍(dòng)後(hòu)的細胞懸液移至含5ml培養基的離心管中,1000rpm離心5min。
      棄去上清液,補(bǔ)加5mL培養基後吹勻,接種於(yú)T25培養瓶中(或6cm皿中),培養過夜。
      第二天換(huàn)液並(bìng)檢查細胞密度。
       
      2. 細胞傳代
      當細胞密度達(dá)到80%-90%時,進行傳(chuán)代培養。
      離(lí)心收集細胞(1000rpm,5-8min),棄(qì)去上清液。
      補(bǔ)加1-2mL培養液後(hòu)吹勻,将細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL培養基的T25培養瓶中或6cm培養皿中。
      對於(yú)較難培養的細胞或新手,可採(cǎi)用豎瓶培養法,逐步補加培養基,待細胞密度升高後再進行傳代。
       
      3. 細胞凍存
      選擇生長(zhǎng)狀态良好的細胞進行凍(dòng)存。
      離(lí)心收集細(xì)胞(1000rpm,5-8min),去除上清液。
      按凍(dòng)存數量加入無血清細胞凍(dòng)存液 ,輕輕混勻後(hòu),分裝入凍(dòng)存管中(每管約1mL細胞懸液)。
      将凍(dòng)存管放入-80℃冰箱中過夜,然後轉入液氮罐中儲(chǔ)存。
       
      五、培養注意事項
      細胞接收與檢查:收到細胞後(hòu),首先檢查細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾(hún)濁等現象。若有異常,請及時與我司(恒遠生物)聯系。
      無菌操作:在細胞培養過(guò)程中,應嚴格遵守無菌操作規(guī)程 ,避免細胞污染。
      細胞密度監控:定期觀察細胞生長(zhǎng)情況,及時傳(chuán)代以避免細胞密度過高導緻死亡。
      培養基更換:根據細胞生長(zhǎng)情況和培養基顔色變(biàn)化,适時更換新鮮培養基。
       
      六、售後(hòu)服務(wù)與細胞保存
      若細胞在運輸或培養過程中出現問題,應及時與我司聯系並(bìng)提供相關證據(如細胞照片 、操作記錄等),以便進行售後處理。細胞應儲存在液氮罐中,避免反複凍融以確(què)保細胞活性。
       
      上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實驗室,備有專業的技術研發團隊,長期緻力於(yú)各種生物試劑,細胞,血清,ELISA試劑盒的研發與銷售,實驗提供免費代測服務,並(bìng)提供技術服務,如果您有實驗上的問題歡迎前來咨詢,爲您提供專業的一對一技術指導。