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胎牛血清培養如何防止黑點生成

  • 發布日期 :2024-10-28      浏覽次數:831
    • 近期有客戶向我們咨詢胎牛血清細胞培養中黑點如何防止生成?對此我司技術專員給出瞭(le)詳細瞭(le)解釋,爲防止客戶由於(yú)操作方面而使黑點生成的辦法。因此定要做好以下幾點。方可使細胞培養順利。


      1.盡可能地減(jiǎn)少血清凍(dòng)融次數。

      2.培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。

      3.培養(yǎng)基保持zuiPH 值7.0-7.2。

      4.嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質,容器定期刷洗。

      5.掌握細胞傳(chuán)代的zui時機,細胞切勿生長(zhǎng)過老。

       一、化凍(dòng) 
      将血清從(cóng)-20 度冰箱中取出,室溫(或浸於(yú)自來水中)化凍(約需要30分鍾至2小時 ,也可放於(yú)4度冰箱化凍過夜;化凍後若不馬上滅活,可以放入4度冰箱中暫時保存)

      二、滅活
      1.放入室溫的水浴鍋(guō)内開始加熱(同時放入一個(gè)空的血清瓶,内裝100ml自來水,插入一根溫度計,溫度監控以此爲準)
      2.當溫度計顯示56度時,停止加熱 ,改爲間斷加熱 ,維持56度(±0.5度)30分鍾(±3分鍾;若不小心使溫度上升超過56度,則 :若仍未超過60度,且時間很短,比如不超過5分鍾,則仍可使用;若超過60度,或者時間較長,則棄去不用,或者嘗(cháng)試用於(yú)一些普通細胞的培養)
      3.取出,自然冷卻至室溫(約需1-3小時),可分裝或-20度繼(jì)續凍(dòng)存。

      三、分裝
      1.轉入無菌間,在超淨台内将血清分裝入10ml離心管中(注意預先要将血清輕輕搖動數周、混勻;用吸液管或吹大管吹出血清時要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易産(chǎn)生氣泡;如果産(chǎn)生氣泡, 則在酒精燈(dēng)火焰上過一下)。
      2.放入-20 度冰箱凍(dòng)存。
      3.全部操作約(yuē)需要4-6小時(shí)。

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