ELISA試劑盒變質原因,您知道多少?

ELISA試劑盒變(biàn)質是ELISA實驗中比較常見的問題，那麽，ELISA試劑盒變(biàn)質是因爲什麽呢？是什麽影響瞭(le)ELISA試劑盒質保？一旦變(biàn)質會有什麽影響呢？恒遠生物爲大家詳細分析下。

 
一、方法學(xué)的影響(xiǎng)   
ELISA測(cè)定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法
、競争抑制法

，其中競争抑制法(HBeAb,HBcAb等採(cǎi)用)因受操作時差所引起的不gong平競争等因素的影響，結果重複性較差，質量較難控制。
 
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量一緻，即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批号的試劑，並(bìng)保證保存條件。嚴格執行這一标準可以避免因試劑批号改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的複雜過程，並(bìng)且能夠保證結果的穩定性；對於(yú)效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反複凍融造成試劑的失效。
 
三、樣本因素
标本幹擾因素包括内源性幹擾因素和外源性幹擾因素，前者包括類風濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，後者包括标本溶血、标本被細菌污染、标本貯存時間過長(zhǎng)
、标本凝固不全、冷凍标本的反複凍融等。
 
四、操作因素
ELISA操作步驟複雜，操作不當(dāng)将引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌(dí)、顯色、比色。
 
五、灰區的設置
通常情況下，ELISA定性實驗以“陽性"和“陰性"來報(bào)告結果，兩者間有一條分界線被稱爲“陽性判斷值"(cut-off value，CO值)，這是定性免疫測(cè)定結果報(bào)告的依據。
 
六、标本複查
ELISA手工檢測(cè)過程複雜，影響因素較多，即使室内質控在控，也可能因孔間差異而造成結果的差異，因此加大複查力度是保證結果準確(què)性的可靠方法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性标本及少見模式的檢測(cè)結果進行複查。
 
七、常表示結果的常用方法
1.定性測定
2.半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。
3.定量測(cè)定 即用已知量的标準品作一系列稀釋後進行ELISA測(cè)定，繪制标準曲線，結果以絕對量或單(dān)位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應闆都必須繪制相應的标準曲線。 
 

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