上海恒遠生物科技有限公司成立於(yú)2010年12月,集研發、生産(chǎn)、銷售爲一體,以科研試劑生産(chǎn)、診斷試劑原料供應生産(chǎn)爲核心,緻力於(yú)爲全球來自高等院校、科研機構、診斷試劑生産(chǎn)廠家以及生物制藥公司的廣大客戶們提供高質量生物産(chǎn)品。恒遠生物現擁有各物種基因産(chǎn)品50餘萬種;重組蛋白20餘萬種;數十個種屬的多克隆抗體3萬多種和高質量單克隆抗體數百種。恒遠品牌自主研發ELISA試劑盒,現已涵蓋20多個種屬,數千種産(chǎn)品,涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領域。恒遠生物爲大家總結,ELISA試劑盒實驗時至關重要的步驟有:
一、重要的洗滌:
不充分的洗滌會導緻差異和高背景,從而帶來不理想的實驗結果。如果未結合的材料殘(cán)留在微孔闆中,那麽它會增加背景噪音。有必要的話,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應。如果背景過高,懷疑洗滌不夠時,可以嘗(cháng)試增加洗滌次數。
二、關鍵的封閉:
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔闆中潛在的結合位點。這就降低瞭(le)可産生信号的抗體非特異結合的機會。如果背景過高,懷疑封閉不充分,那麽可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或适當延長封閉時間。目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。使用的類型須取決於(yú)多個因素,包括微孔闆的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的封閉液應降低非特異性結合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發生相互作用。
三、抗體濃度須優化:
如果試劑稍有不同,則可能需要優化抗體的量。非特異的抗體結合會增加背景。爲瞭(le)防止這一點(diǎn),切勿使用過多的一抗或二抗。
四、檢測試劑要适量:
切勿使用過多的檢測(cè)試劑。如果濃度過高,或者未正確(què)稀釋,則會導緻高背景。ELISA試劑盒也不要顯色過度,如有必要,優化一下何時應加入終止液。隻有確(què)保每一步操作都做到位,才會呈現好的實驗結果。所以ELISA實驗的每一步都很重要,不可以掉以輕心。
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