微生物爲廣泛分布於(yú)自然界中的一群肉眼看不到的微小生物，包括細菌 、螺旋體、立克次體、衣原體、支原體、放線菌、真菌、病毒等類，其結構簡單，以單細胞、細胞群體或非細胞狀态存在，在提供營養物質和适宜環境的條件下，一般都能獨立生活 ，迅速生長繁殖 。爲瞭(le)避免微生物死亡、污染 ，保持其原有性狀基本穩定，便於(yú)研究和使用 ，需要用到菌種保藏技術。菌種的保存主要是指通過降低細菌新陳代謝的速度, 使細菌的生命活動處於(yú)半yongjiu性休眠狀态, 以達到長期保藏的目的以及減少菌種的更新需求來降低實驗生産(chǎn)成本。微生物菌種的保存方法由於(yú)微生物種類的不同而略有差距 ，接下來給大家介紹一些常見的菌種保存的方法：
1.低溫冷凍保藏法
該方法适合大多數需要長(zhǎng)期保存的微生物，病毒等。原理爲在超低溫環境下時，微生物代謝活動停止，一般溫度越低效果越好。使用凍存管對菌種進行保存，同時需要保護劑，一般使用甘油、脫脂羊粉或者二甲亞砜等保護劑。講含有菌種的凍存管置於(yú)-60~-80℃冰箱中冷凍保存。
2.液體石蠟保藏法
液體石蠟保藏法适用於(yú)一些不能分解石蠟的菌類，例如酵母菌、芽孢杆菌屬、青黴屬、曲黴屬等，一些細菌和真菌並(bìng)不适合用該方法進行保存。液體石蠟法使用液體石蠟覆蓋，微生物代謝被抑制，菌種老化推遲 。石蠟法可以防止氧氣進入，使得需氧菌無法繼續生長，同時若培養基水分蒸發，容易導緻細菌死亡，石蠟法可防止培養基水分蒸發，延長菌種保存時間。無菌條件下将滅菌的液體石蠟注入剛培養好的斜面培養物上，液面高出斜面頂端1cm~2cm，加膠塞並(bìng)用固體石蠟封口，使菌種與空氣隔絕。将注人石蠟油的菌種斜面直立存放於(yú)低溫（4℃~6℃）幹燥處或室溫下保存。
3.冷凍幹燥保藏法
該方法适合大多數微生物的保存，但不适用於(yú)不産孢子的絲狀真菌。冷凍幹燥保藏法是在低溫、幹燥、缺氧條件下保藏菌種。即在低溫條件下快速地将菌種凍結，使微生物保持完整，然後減壓抽直空使冰升華直至脫水幹燥，並(bìng)在直空狀态密封隔絕空氣，使微生物代謝活動停止，得以長期保藏。按照一定配方配置保護劑加入安瓿管，然後再加入菌種制備成菌懸液。先将安瓿管進行預凍存至-15~-20℃，然後用冷凍真空幹燥機對安瓿管進行幹燥，並(bìng)将安瓿管進行熔封。（低溫避光保存）
4.沙土管保藏法
該方法适合用於(yú)産孢類放線菌、芽孢杆菌等的保存，不适合以菌絲發育爲主的真菌和病原性真菌的保藏。使用細沙土創造幹燥條件，使那些能夠産生孢子或芽孢的微生物在幹燥環境中的代謝活動減緩，抑制其繁殖速度，且抵抗力強不易死亡 。該方法能減少菌株突變，延長存活時間。将河、海沙用60目過篩，棄去大顆粒及雜質，再用80目過篩，去掉細沙。用吸鐵石吸去鐵質，放入容器中用10%鹽酸浸泡，如河沙中右機物較多可用20%鹽酸浸泡 。24h後倒去鹽酸，用自來水浸泡數次至中性，将沙子烘於(yú)或曬幹 。另取未被污染的地表以下十壤用100日讨篩，自來水洗至中性，烘幹。按沙：土=2：1混合均勻，分裝人安瓿管或小試管中，高度爲1cm左右，塞好棉塞，121℃高壓滅菌1~1.5h，或常壓間歇滅菌3次、每天每次16。在50℃以下烘幹（溫度不宜過高，影響菌種性能），經檢查無微生物生長方可使用。之後制備菌懸液並(bìng)将菌懸液加入沙土管中。講含有菌懸液的沙土管放入真空幹燥器中進行真空幹燥。使用火焰封融管口，存放於(yú)低溫（4℃~10℃）或常溫幹燥處，定期檢查活力及雜菌情況。
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