何爲ELISA邊緣效應?

    邊(biān)緣效應的定義是酶标闆孔内中心部分與酶标闆孔内遠離中心部分之間相比存在明顯的信号差異，一般歸因於(yú)兩個主要因素。

    孵育環境確(què)實對(duì)實驗有影響嗎？

    是的。孵育時溫度不均會引起邊(biān)緣效應。請嚴格按照推薦的溫度進行孵育。如果條件允許，可以在能夠(gòu)控溫的孵育器中進行孵育。

    在使用之前将所有試(shì)劑(jì)平衡至室溫。（除非特别說明）

    在實驗開始之前檢查工作的環(huán)境溫度。如果曲線很平直，可能是由於(yú)工作環(huán)境溫度低於(yú)氣溫所緻。

    在孵育末期我注意到蓋闆一側(cè)突起來瞭(le)，這是否會影響我的實驗結果？ 

    蓋闆如果使用不恰當(dāng)會導緻邊(biān)緣效應。

    使用96孔闆的ELISA測定中，常發現有“邊緣效應”，即外周孔顯色較中心孔深。經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身爲不良熱導體，在實驗室的常規ELISA測定中，将闆從室溫（通常在25℃左右）置於(yú)37℃溫箱，闆也升溫時，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在将反應溶液加入至闆孔中時，将闆和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應”，並(bìng)且可提高測定的重複性。 

    Elisa試劑盒還有就是在試驗中
，必定有運用微量加樣器參(cān)加樣本的步驟。提示留意：加樣不行太快，要防止加在孔壁上部，不行濺出和發生氣泡。ELISA試劑盒太快的話無法保證微量加樣的準確(què)性和均一性。加在孔壁上部的非包被區，易緻使非特異吸附。濺出會對附近孔發生污染。出現氣泡則反響液界面有區别。所以，有時分一份标本用一樣的試劑盒這次測定爲陽性，下次測定爲陰性，通常就是上述加樣及試劑的過錯所造成的。



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