原代細胞培養是建議細胞系的di一步 ，但是有很多小夥伴在原代細胞上就會(huì)有很多疑惑哦，主要有以下幾大問題，小編(biān)都爲大家整理好咯，搬上你的小闆凳，一起來看看！
一、原代細胞與細胞系有什麽(me)區(qū)别？
答：根據傳統定義，自組織di一次收獲和接種的細胞被稱(chēng)爲原代細胞，這類細胞直接從組織分離，生命周期有限 ，經數次傳代後會逐漸停止生長(zhǎng)。原代細胞在有限的生命周期内需掌握好細胞的大生長(zhǎng)空間，以保持細胞群中基因型和表型的一緻性。
細胞系是不斷生長(zhǎng)、分化的細胞群 ，因其經過遺傳改造，緻使其具有無限增長(zhǎng)的潛能。體外生長(zhǎng)的細胞系用於(yú)醫療或科研。
但實際上 ，經過長時間 、連續的傳代培養後 ，細胞系随著(zhe)代數的增加，細胞的基因型和表型都有可能發生改變(biàn) 。
需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同 。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群，除非細胞經過瞭(le)遺傳(chuán)改造 。
二、倍增和代數有什麽(me)區(qū)别？
答：倍增是培養物中細胞總數的翻倍，通常是指細胞指數或對數生長(zhǎng)期。代數是指細胞群從培養瓶中移出，傳代培養過程的次數，傳代培養的目的 ，是使細胞處於(yú)低密度以刺激其進一步生長(zhǎng)。
三、接收到的凍(dòng)存細胞該如何處(chù)理？
答 ：收到包裝箱後，立即将凍存細胞從(cóng)幹冰移入液氮中凍存。此過程盡量快，以避免升溫 。不要将細胞儲(chǔ)存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
四、凍(dòng)存的細胞該(gāi)如何開始培養？
答 ：主要分爲(wèi)以下9點(diǎn)：
1.将一管細胞從(cóng)液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛 。
2.将凍(dòng)存管快速的放入37℃水浴中 ，輕輕握住並(bìng)旋轉 ，直到管内物體*融化。
3.将凍(dòng)存管立即從(cóng)水浴中拿出，擦幹，轉入無菌環境 。
4.用70％的酒精沖(chōng)洗凍(dòng)存管，然後擦去多餘酒精。
5.打開蓋子，注意手指不要碰到裏面的螺紋（注意，由於(yú)凍(dòng)存管有負壓，開蓋時可能會有少量溢出 ，這是正常現象）。
6.用多聚賴氨酸（或參(cān)照說明書）包被培養瓶。多數細胞推薦的接種密度爲每平方厘米5000個(gè)細胞。
7.蓋(gài)好培養瓶的蓋(gài)子，輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換(huàn)可打開蓋(gài)子。
8.将培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中（37℃，5%CO2，95%空氣(qì)）
9.放入培養箱後第6-16小時更換一次培養基，以去除殘(cán)留的二甲基亞楓(fēng)和未貼壁的細胞。
五、細胞培養過(guò)程中，多久更換(huàn)一次培養基？
這取決於(yú)細胞生長(zhǎng)的速度。一般而言2-3天更換一次培養基，許多細胞培養實驗室通常在周一，周三，周五更換培養基。
注意 ：凍(dòng)存細胞複蘇後，在6-16小時内更換培養基，以去除殘(cán)留的二甲基亞楓和死亡的細胞。
六、我能擴(kuò)增培養和再次凍(dòng)存原代正常人類細胞嗎？
答：這取決於(yú)細胞的類型。一些細胞類型像神經細胞，神經膠質細胞和一些生長(zhǎng)緩慢的上皮細胞，不推薦擴增培養和再次凍存。其它的細胞類型像成纖維細胞、星形細胞、腎系膜細胞、星形膠質細胞等等，可以擴增培養和再次凍存。
然而，需要注意的是再次凍存的過程可能導緻細胞生長(zhǎng)性能的改變(biàn)。
七、培養瓶中應該(gāi)加入多少體積(jī)的培養基？
答：我們(men)推薦(jiàn)的用量爲：T-25培養瓶5ml，T-75培養瓶15ml，T-150培養瓶30ml。
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